Quelle est la meilleure façon de vérifier la présence de gonocoques

L'infection gonococcique peut facilement provoquer certaines maladies de la reproduction, il convient donc de prêter attention à certains examens des gonocoques. Les méthodes d'examen comprennent l'examen par frottis de sécrétion, l'isolement et la culture des gonocoques et le test d'oxydase.

1. Examen par frottis des sécrétions

Convient principalement aux hommes.

(1) Nettoyez l’ouverture urétrale avec une solution saline stérile.

(2) Après avoir porté des gants stérilisés, utilisez vos doigts pour faire sortir le pus de la base du pénis vers l'ouverture urétrale. Utilisez une anse d'inoculation ou un coton-tige pour récupérer le pus et l'appliquer délicatement sur une lame de verre. Une fois qu'il a séché naturellement, chauffez-le et fixez-le, effectuez une coloration de Gram, puis examinez-le au microscope.

(3) Le diagnostic peut être confirmé lorsque des néphrotiques à Gram négatif sont détectés dans les leucocytes polynucléaires.

2. Isolement et culture des gonocoques

(1) Collection de matériaux.

① Lors du prélèvement d'échantillons dans l'urètre de patients de sexe masculin, un petit coton-tige peut être inséré dans l'urètre de 2 à 4 cm et les sécrétions (qui doivent être légèrement muqueuses) peuvent être retirées après une rotation douce.

② Lors du prélèvement sur des patientes, utilisez d'abord un spéculum vaginal pour exposer l'orifice cervical, essuyez les sécrétions à la surface de l'orifice cervical avec un coton-tige stérile, puis prenez un autre coton-tige et insérez-le de 1 à 2 cm dans l'orifice cervical, faites-le tourner et restez pendant 10 à 20 secondes avant de le retirer.

③ Lors du prélèvement d'échantillons dans le rectum, le coton-tige doit être inséré de 2 à 3 cm dans l'anus.

④ Lors de l’examen de la pharyngite gonococcique, des échantillons doivent être prélevés au niveau des amygdales et de la fosse amygdalienne.

⑤ Des échantillons de sécrétions vaginales peuvent être prélevés sur des filles prépubères.

(2) Une fois l'échantillon prélevé, il est immédiatement inoculé dans le milieu de culture. Actuellement, on utilise couramment de la gélose au sang ou de la gélose au chocolat additionnée de polymyxine.

(3) Pour la séparation initiale, un pot à bougie contenant 5 à 10 % de CO2 doit être utilisé, la température de culture doit être de 36 °C, l'humidité relative doit être supérieure à 80 % et la culture doit être conservée pendant 24 à 48 heures pour observer les résultats.

(4) Après 24 à 48 heures de culture sur gélose au sang polymyxine B, les gonocoques peuvent former des colonies rondes, surélevées, humides, lisses, translucides ou blanc grisâtre avec des bords en forme de pétale et un diamètre de 0,5 à 1,0 cm. Elles sont collantes lorsqu'elles sont touchées par une anse d'inoculation. Si la culture se poursuit, le volume de la colonie augmentera, la surface sera rugueuse et les bords rétréciront.

3. Identification de Neisseria gonorrhoeae - Test d'oxydase

(1) Préparation du réactif d'oxydase : solution aqueuse de chlorhydrate de diméthyl-p-phénylènediamine à 0,5 % à 1 %.

(2) Ajoutez la solution goutte à goutte sur la colonie bactérienne suspecte et observez le changement de couleur. Vous pouvez également déposer d'abord le réactif sur un petit morceau de papier filtre, puis prélever les colonies suspectes pour les contacter et observer le changement de couleur.

(3) Les colonies deviennent rouges dans les 15 à 20 secondes suivant le contact avec le réactif d'oxydase, restent rouges pendant plus de 30 secondes, puis deviennent progressivement violettes et enfin noires. Cela indique un test d'oxydase positif, confirmant que les colonies sont des gonocoques.