Quelles sont les étapes à suivre pour tester le VPH

Quelles sont les étapes à suivre pour tester le VPH

Le nom scientifique du VPH est « virus du papillome humain ». Si l'état du patient est grave, il peut évoluer vers un cancer du col de l'utérus. Les scientifiques ont confirmé que ce virus est un virus génétique et une maladie que seuls les humains peuvent contracter. Une fois que les humains sont infectés par le virus, il y aura une longue période d’incubation, et une fois que le virus aura le temps nécessaire, il provoquera la maladie. Le dépistage du VPH a considérablement amélioré le taux de détection et les méthodes de détection sont basées sur l'examen cytologique. Cet article présente brièvement ces méthodes.

1. Les principales méthodes de détection des laboratoires HPV existants :

① Réaction en chaîne par polymérase (PCR,

Réaction en chaîne par polymérase : méthode permettant d'amplifier un fragment d'ADN situé entre deux séquences connues. Cette méthode est très sensible et peut être utilisée pour le typage du VPH. Cependant, elle présente l'inconvénient d'être très exigeante en termes d'environnement de laboratoire et d'être sujette à une contamination croisée entre les échantillons, ce qui entraîne un taux élevé de faux positifs.

② Détection d’hybridation d’acide nucléique

Il présente une bonne spécificité et une bonne sensibilité et peut également être utilisé pour le typage de l'ADN du VPH. Diverses méthodes de détection par hybridation d'acides nucléiques présentent certains avantages et inconvénients.

A. Hybridation in situ d'acide nucléique

Il est adapté au typage du VPH et à l'identification du poids moléculaire de l'ADN du VPH. Bien qu'il soit très sensible, il n'est pas adapté à une utilisation clinique à grande échelle en raison de son fonctionnement compliqué et de la nécessité d'échantillons de tissus frais.

Tache de points B

Sa sensibilité et sa spécificité sont inférieures à celles de l'hybridation in situ par transfert d'acide nucléique. Bien qu'elle soit économique et pratique, le processus expérimental entraîne une pollution radioactive, ce qui constitue un problème qui ne peut être ignoré pour la protection de l'environnement.

L'hybridation in situ (hybridation in situ, une technologie d'hybridation d'acide nucléique qui peut être utilisée pour déterminer l'emplacement de gènes ou de séquences nucléotidiques spécifiques dans des molécules d'acide nucléique et détecter l'ADN recombinant) utilise des sondes non radioactives pour détecter les tissus de paraffine. Elle peut effectuer une détection de positionnement avec un faible taux de faux positifs, mais la sensibilité n'est pas élevée, ce qui réduit considérablement sa valeur clinique.

Capture hybride

Le test de capture d'hybridation utilise la chimioluminescence pour amplifier le signal capturé par l'anticorps. Tout d'abord, l'ADN double brin est libéré et décomposé en nucléotides monocaténaires qui peuvent s'hybrider. L'ADN simple brin se combine avec la sonde de combinaison d'ARN pour former un hybride ARN-ADN. L'hybride ARN-ADN est capturé par un anticorps spécifique. Le deuxième anticorps couplé à une phosphatase alcaline se combine avec l'hybride ARN-ADN. La phosphatase alcaline provoque l'émission de lumière par le substrat enzymatique. La teneur en phosphatase alcaline peut être déterminée en fonction de l'intensité de la lumière, déterminant ainsi la teneur en hybride ARN-ADN. Il peut détecter 13 types de VPH à haut risque, notamment les VPH 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 et 68.

2. La dernière technologie de test HPV en laboratoire

Réactif PCR en temps réel à fluorescence multicolore pour le typage HPV à haut risque et haute sensibilité : un réactif PCR en temps réel à fluorescence multicolore pour le typage HPV à haut risque, nouvellement conçu pour le dépistage du cancer du col de l'utérus par une célèbre institution européenne de recherche en biologie moléculaire. Il peut détecter simultanément les types à haut risque les plus importants 16, 18, 31/33, 35/45.

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