Que sont les cellules épithéliales

Le corps humain est composé de nombreuses cellules, et chacune d'entre elles a des fonctions différentes. Il est donc nécessaire d'avoir une compréhension globale des cellules. Lorsqu'un problème survient avec les cellules humaines, nous savons quel type de dommage cela causera à la santé humaine. Les préférences des différentes parties du corps humain sont différentes, et leur nombre est également différent. Alors, que sont les cellules épithéliales ? Beaucoup de gens ne sont pas très clairs sur cette question.

De nombreuses personnes ne savent pas ce que sont les cellules épithéliales basses. Vous pouvez obtenir des conseils détaillés sur ces questions afin que, lors de la culture de cellules épithéliales, vous sachiez quelle méthode est la meilleure à choisir sans nuire à votre santé.

Que sont les cellules épithéliales ?

Culture de cellules épithéliales

1) Culture de cellules épidermiques

1. Collecte de matériel : Prélevez de petits morceaux de greffes cutanées chirurgicales ou de peau résiduelle provenant d'une intervention chirurgicale, de préférence avec une fine couche kératinisée, et la peau des bébés prématurés avortés est encore meilleure, et coupez-les en petits morceaux de 0,5 à 1 centimètre carré.

2. Traitement EDTA : premièrement dans 0,02 % d'EDTA à température ambiante pendant 5 minutes.

3. Digestion à froid : remplacer par 0,25 % de trypsine et incuber à 4 °C pendant la nuit.

4. Séparation : Retirez la peau et utilisez une pince ou une pince à épiler pour séparer l’épiderme et le derme.

5. Digestion à chaud : retirez l'épiderme et traitez-le séparément. Coupez-le en petits morceaux avec des ciseaux, placez-le dans de la trypsine à 0,25 % et faites-le digérer à 37 ℃ pendant 30 à 60 minutes supplémentaires.

6. Utilisez une pipette pour souffler doucement de haut en bas afin de créer une suspension cellulaire.

7. Milieu de culture : Après filtration à travers une maille en acier inoxydable de 80 mesh, centrifuger à basse vitesse, aspirer le surnageant, ajouter directement la solution Eagle et 20 % de sérum de veau pour faire une suspension cellulaire, inoculer dans une boîte de Petri et cultiver dans un incubateur à CO2.

2) Culture de tissu mammaire

Méthode de culture directe : (convient à la culture de tissus mous contenant peu de fibres)

1. Dans un récipient contenant une petite quantité de milieu de culture ou de solution de Hanks, utilisez une lame tranchante pour couper le tissu en morceaux à plusieurs reprises.

2. Injectez les fragments de tissu et le liquide dans un tube à centrifuger, ajoutez une petite quantité de milieu de culture, soufflez avec une pipette pendant un moment et placez dans un support de tube à essai pendant 3 à 5 minutes. L’aspiration du liquide surnageant peut éliminer les parties de cellules non mammaires. Répétez 2 à 3 fois.

3. Après le dernier traitement, ajoutez plus de milieu de culture dans le tube de sédimentation et soufflez légèrement avec une pipette pour remettre le sédiment en suspension. Sans attendre que les amas cellulaires tombent, filtrer à travers 3 à 4 couches de gaze stérile dans un autre tube.

4. Ajustez la densité appropriée et inoculer dans des flacons de culture pour la culture.

Méthode de digestion par collagénase : (adaptée au traitement des tissus plus durs contenant plus de fibres)

Le processus est le même que pour la culture d’autres tissus.

3) Culture de cellules épithéliales gastriques

1. Échantillonnage : Prélever une petite quantité de muqueuse de la zone non lésée à l’extrémité distale de l’échantillon gastrique retiré lors d’une chirurgie d’ulcère gastrique ou d’un cancer gastrique.

2. Nettoyage : Après rinçage avec une solution contenant de la gentamicine (400 μg/ml) et de l'amphotéricine (2 μg/ml dans Hanks), décoller la muqueuse inférieure avec un instrument émoussé et couper en morceaux de 1 mm3.

3. Digestion : Digérer dans la collagénase de type I et l'hyaluronidase à 37°C pendant 80 minutes.

4. Centrifugation : recueillir la suspension cellulaire, centrifuger à 800 tr/min et rincer deux fois avec la solution de Hanks.

5. Inoculation : après la dernière centrifugation, ajouter le milieu de culture complet contenant 1 à 2 % de sérum bovin fœtal et inoculer dans des plaques de culture comportant différents nombres de puits. La quantité d'inoculation dépend du but de l'expérience.

4) Culture d'hépatocytes

Culture de bloc de tissu primaire : prenez un foie frais, retirez d'abord les composants fibreux tels que la membrane et les vaisseaux sanguins, utilisez un couteau ou des ciseaux pour couper le foie en petits morceaux d'environ 1 mm3 et utilisez la méthode de culture attachée à la paroi.

5) Culture de cellules endothéliales

1. Prenez le cordon ombilical frais après l’accouchement. S'il n'est pas cultivé immédiatement, il peut être conservé à 4°C, mais pas plus de 12 heures. Couper aseptiquement en sections de 10 à 15 cm de long. D’autres, comme les gros vaisseaux sanguins des embryons et des jeunes animaux, peuvent également être utilisés pour la culture.

2. Utilisez d'abord une seringue à trois voies pour absorber la solution PBS chaude et injectez-la dans la veine du cordon ombilical pour éliminer le sang résiduel. Le port d'injection doit être fermé par une ficelle pour éviter le reflux du liquide.

3. Pincez une extrémité du cordon ombilical avec une pince vasculaire et injectez lentement de la collagénase à une concentration finale de 0,1 % dans la veine ombilicale à partir de l'autre extrémité. Une fois que du liquide apparaît à l'extrémité, ligaturez-le pour remplir les vaisseaux sanguins. Le port d'injection doit également être ligaturé pour éviter le reflux de liquide. Digérez pendant 3 à 10 minutes.

4. Aspirez le liquide de digestion contenant les cellules endothéliales et injectez-le dans un tube à centrifuger. Pour obtenir plus de cellules, injectez du PBS chaud pour rincer 2 à 3 fois afin d'éliminer complètement les cellules restantes et injectez-les dans le tube à centrifuger pour la centrifugation.

5. Aspirer le surnageant, ajouter du milieu de culture 1640 pour obtenir une suspension cellulaire, inoculer dans des flacons et mettre en culture. Si tout se passe bien, les cellules peuvent se développer en monocouche en 2 à 3 jours.

Grâce à l'introduction ci-dessus, nous avons une idée de ce que sont les cellules épithéliales et des méthodes de culture des cellules épithéliales. Tout cela est expliqué en détail. Cependant, lors de leur culture, vous ne pouvez pas le forcer. Vous devez choisir en fonction de vos propres besoins. Cela sera d'une grande aide pour tous les aspects du corps humain.